Alexa Fluor 647-Labeled SLAMF7/CRACC/CD319 Fc Chimera是一种针对免疫调遣弱点受体SLAMF7策划的高性能、模块化检测探针。信号淋巴细胞活化分子家眷成员7是主要抒发于浆细胞、当然杀伤细胞、细胞毒性T细胞及部分B细胞亚群的自己配体受体,在免疫突触变成、淋巴细胞活化与细胞毒性功能调控中起中枢作用,尤其看成多发性骨髓瘤的弱点名义标志物和颐养靶点而备受关心。该探针通过将SLAMF7胞外域的高特异性识别才智,与远红外荧光染料Alexa Fluor 647的优厚光谱特质及Fc片断的通勤勉能相结合,为免疫细胞分析、血液肿瘤会诊及免疫颐养研究提供了一个高分辨率、高兼容性的多光谱检测平台。
一、详尽:分子结构与策划逻辑
该卵白是一种经基因工程重组和化学修饰构建的功能性交融探针,其结构包含三个协同作用的功能模块:
SLAMF7胞外域结合模块
探针的中枢是东说念主SLAMF7卵白的胞外免疫球卵白样结构域。SLAMF7(又称CRACC或CD319)属于SLAM家眷受体,其胞外域包含两个免疫球卵白样结构域,大略介导同型互相作用。该模块保留了与细胞名义自然SLAMF7受体或可溶性SLAMF7结合的才智,竣事对抒发该分子的免疫细胞及肿瘤细胞的特异性靶向。
伸开剩余87%Fc Chimera结构
SLAMF7胞外域与东说念主免疫球卵白G的Fc片断通过基因交融变成嵌合体。这一策划赋予探针双重上风:
通用检测与信号放大平台:Fc片断为使用任何物种开始、任何标志神气的抗Fc二抗提供了通用结合位点。用户可凭据多色实验的通说念分拨需求,目田聘任不同荧光标志的二抗,或将信号挪动至其他检测风光。
潜在的功能调遣才智:通过抗Fc抗体可竣事探针在细胞名义的交联,模拟SLAMF7自然的同型二聚化,可能用于研究受体交联对下流信号(如EAT-2/SAP筹商卵白招募)的调遣作用。
Alexa Fluor 647荧光标志
通过共价键将高性能荧光染料Alexa Fluor 647结合到卵白上。AF647在633 nm或640 nm激光激励下辐射远红外荧光,其中枢价值在于:
超卓的多色兼容性:辐射光谱与FITC、PE、PerCP等常用荧光素的辐射峰高度分离,在多色流式或荧光成像实验中极大减少了光谱重复(溢漏),确保SLAMF7信号的结拜度和定量准确性。
高亮度与光褂讪性:亮度优于传统APC,且更耐光漂白,适用于万古期活细胞成像、高内涵筛选及对弱抒发抗原的灵巧检测。
适用于深层成像:远红光受组织自觉荧光侵略小,穿透力更强,故意于对组织切片或3D模子进行高质地成像。
策划理念
此探针是面向复杂免疫学多参数分析的专科化贬责决策。SLAMF7胞外域是精确识别主张细胞"身份徽章"的"智能诱掖头";Alexa Fluor 647是搭载于孤苦、明晰"远红外通信频说念"的"加密信号辐射器",确保在密集的"频谱环境"中信息无侵略传输;Fc Chimera则是兼容各类"外部成立"(不同二抗)的"多功能适配器",极地面拓展了应用场景。
二、核神思制:高保真检测与受体互相作用研究
该探针的中枢功能在于竣事SLAMF7的高特异性、高分辨率检测,并可用于研究其互相作用。
1. 特异性识别与高分辨率检测
精确标志SLAMF7阳性细胞:该探针可特异性结合抒发SLAMF7的细胞,如多发性骨髓瘤细胞、浆细胞、活化NK细胞和CD8+ T细胞亚群。AF647的高信噪比使其能明晰区分阳性和阴性群体,即使是抒发水平较低的细胞亚群。
流式细胞术多色分析的基石:在多色免疫分型中,AF647通说念的洁净度使其成为理念念聘任。不错安谧地与标志在FITC、PE、BV421等通说念的抗体联用,同期分析SLAMF7与其他名义标志物(如CD38、CD138、CD56、CD3、CD8)的共抒发,竣事细胞亚群的精致离别。
2. 可视化与空间定位分析
免疫荧光与共聚焦成像:用于检测细胞涂片、细胞爬片或组织冰冻切片中SLAMF7的亚细胞定位与抒发风光。可研究SLAMF7在免疫突触处的会聚情况,或其在肿瘤微环境中的漫步。
组织多重标志:在多重免疫组化实验中,AF647标志的探针是构建复杂免疫细胞图谱的弱点组分,可同期不雅察SLAMF7+细胞与其他免疫细胞、肿瘤细胞的空间联系。
3. 受体互相作用与功能研究
结合能源学分析:哄骗其Fc部分,可将探针固定于生物传感器芯片,通过名义等离子共振时候,定量分析SLAMF7与自己或与其他卵白的互相作用亲和力与能源学。
竞争与阻断实验:看成可溶性受体,可用于竞争性扼制细胞间的SLAMF7同型互相作用,或阻断颐养性抗体(如Elotuzumab)与靶点的结合,从而考证议论功能的分子基础。
三、下流应用:从免疫生物学到临床肿瘤学
该探针在基础免疫学、血液肿瘤诊疗及免疫颐养研发中具有普遍应用。
1. 多发性骨髓瘤的会诊与生物学研究
肿瘤细胞的辩认会诊与分型:SLAMF7在绝大大量多发性骨髓瘤细胞上高抒发,是区别于其他B细胞恶性肿瘤(如CLL、淋巴瘤)及响应性浆细胞增加的弱点辩认标志物。该探针是流式细胞术检测轻细残留病的中枢试剂之一。
研究SLAMF7的促肿瘤功能:研究SLAMF7信号何如促进骨髓瘤细胞增殖、存活、与骨髓基质细胞的粘附及耐药。
2. 免疫细胞功能与分型研究
NK细胞功能研究:SLAMF7是NK细胞活化性受体。该探针可用于研究不同活化现象NK细胞上SLAMF7的抒发动态,偏捏与细胞毒性功能、细胞因子产生的关联。
浆细胞与B细胞亚群分析:用于辩认和分选不同分化阶段的浆细胞和特定B细胞亚群,研究其在自己免疫病和感染中的作用。
CD8+ T细胞分析:检测细胞毒性T细胞上SLAMF7的抒发,研究其与T细胞耗竭、缅念念分化和抗肿瘤功能的议论。
3. 靶向SLAMF7的免疫颐养研发与评估
Elotuzumab等抗体药物的作用机制研究:看成Elotuzumab(靶向SLAMF7的单抗)的模拟探针或竞争剂,用于研究该药物何如通过与SLAMF7结合,增强NK细胞介导的ADCC效应。
CAR-T/CAR-NK细胞颐养:
靶点考证:在征战SLAMF7靶向的CAR疗法前,准确评估患者肿瘤细胞及正常免疫细胞上SLAMF7的抒发谱至关垂危。
疗效监测与逃遁机制:颐养后监测SLAMF7抗原抒发水平的变化,是评估CAR-T细胞压力聘任下抗原逃遁的垂危技巧。
斡旋颐养计策探索:研究SLAMF7靶向药物与免疫搜检点扼制剂、免疫调遣剂等斡旋应用时,对免疫微环境的影响。
四、将来预测:整合前沿时候的精确免疫分析
看成先进器具,其发展将与免疫学研究的新范式紧密结合。
与超高维单细胞分析时候联用
质谱流式与光谱流式:征战基于调换结合域的金属标签抗体或平直用于光谱流式的抗体,竣事与30-50个其他参数的同期无串扰检测,深度融会SLAMF7+细胞在肿瘤或组织中的高度异质性。
CITE-seq与卵白质组学整合:结合单细胞测序,在单细胞水平关联SLAMF7卵白抒发与全转录组信息,精确界说功能细胞亚群。
空间多组学与微环境融会
看成弱点标志物整合到CODEX、IMC或多重免疫荧光平台,在骨髓、淋巴组织或肿瘤组织华夏位绘画SLAMF7+细胞的精确空间漫步图,并分析其与左近细胞的空间互相作用会聚。
动态活细胞成像与功能筛选
哄骗AF647优异的光褂讪性,进行延时活细胞成像,及时不雅察SLAMF7在免疫突触变成过程中的召募与漫步能源学,或跟踪CAR-T细胞与肿瘤细胞斗争时SLAMF7的空间变化。
结合高内涵成像系统,高通量筛选调遣SLAMF7抒发或功能的化合物。
新式诊疗一体化探针征战
哄骗其Fc片断的生动性,可征战同期偶联会诊性荧光分子和颐养性放射性核素的 "诊疗一体"探针,用于临床前模子中的靶向定位与颐养评估。
临床奉陪会诊的圭臬化与自动化
鼓动基于该探针检测旨趣的圭臬化、自动化流式或数字病理分析经过,看成SLAMF7靶向药物临床测验分层的奉陪会诊器具,并最终应用于临床实行。
回来
Alexa Fluor 647-Labeled SLAMF7 Fc Chimera是结合基础免疫学发现与临床免疫颐养挪动的一座精密桥梁。它将一个在淋巴细胞通信与肿瘤生物学中至关垂危的受体,挪动为一个能在最复杂多色分析系统中被明晰、孤苦解读的高性能信号。从融会NK细胞杀伤的分子开关,到精确会诊与监测多发性骨髓瘤;从深入探索Elotuzumab的起效机制,到赋能下一代SLAMF7-CAR疗法的征战与优化,这个"多光谱精确探针"恒久是免疫学家和肿瘤学家手中弗成或缺的中枢器具。将来,跟着单细胞空间组学、活体动态成像和东说念主工智能分析的特等,以此探针为代表的高性能卵白器具将鼓动咱们以系统化、动态化和定量化的全新视角,更潜入地连气儿免疫识别与肿瘤免疫裁剪的玄机,并加快更有用、更精确的免疫颐养计策的问世。
声明:本篇著作在创作中部分禁受了东说念主工智能扶植。如有任何践诺触及版权或学问产权问题,敬请申报,咱们甘心将在第一时代核实并撤下。
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